پژوهشگر

همکاران پژوهشگر

چکیده پژوهش

زمینه و هدف: نوروپاتی شنوایی یکی از اشکال معمول ناشنوایی در انسان است که با درمان¬های جایگزین قابل درمان نیست و به نظر می¬رسد که سلول¬های بنیادی پالپ دندان انسان که از جمعیت سلولی نورال کرست اکتومزانشیمی منشا می¬گیرند می¬تواند منبع امیدوارکننده¬ای برای تمایز نورونی و ترمیم باشند. از طرفی، مطالعات نشان داده است که miR-124a نقش مهمی در تکوین نورون¬های شنوایی که در ناشنوایی حسی¬عصبی تخریب می¬شوند، دارد. روش بررسی: به¬طور خلاصه، سلول¬های بنیادی جداسازی شده پالپ دندان انسان به عنوان منبع سلولی انتخاب شدند و پس از بررسی بیان مارکرهای بنیادینگی OCT4, NANOG و اطمینان از دارا بودن ویژگی سلول بنیادی، تحت ترانسفکشن miR-124a با استفاده از لیپوفکتامین قرار گرفتند. پس از بررسی صحت ترانسفکشن، بیان ژن¬های GATA3, PRPH و TUBB3 در سطح RNA (Real time-PCR) و پروتیین (ایمونوفلورسنس) ارزیابی شد. همچنین در استراتژی های مجزای دیگری، سلول ها ابتدا تحت تیمار با فاکتورهای رشد (BDNF و EGF/bFGF) قرار گرفتند و پس از ترانسفکشن miR-124a بیان مارکرهای نروپروژنیتوری و نورونی ارزیابی شدند.

خلاصه نتایج حاصله

یافته¬ها: نتایج Real time-PCR نشان داد که 6 ساعت پس از ترانسفکشن، NES افزایش بیان و در 24 و 48 ساعت کاهش بیان داشته است. همچنین در 6 و 16 ساعت پس از ترانسفکشن،TUBB3 در سطح RNA افزایش بیان و در 48 ساعت کاهش بیان داشته است. تغییرات مورفولوژیک و تشکیل کلونی¬های شبه نروسفر در سلول¬های تیمار شده با BDNF و EGF/bFGF مشاهده شد. نتایج Real time-PCR نشان داد که در سلول¬های تیمار شده با BDNF ژن¬های NES و SOX2 افزایش بیان و ژن¬های MAP2 و PRPH کاهش بیان داشتند، در حالی¬که در گروه تیمار شده با EGF/bFGF ژن¬های NES، MAP2، PRPH و TUBB3 افزایش بیان داشتند. بیان SOX2 و NES در سطح پروتیین در هر دو گروه مورد ارزیابی قرار گرفت و تغییرات تایید شد.

فایل های پژوهش